博梵小剧场系列篇之试纸条贴板的“小心机”
免疫层析检测试纸条的结构较为简单,,,主要由样品垫、、金标垫(金垫/共轭垫/结合垫)、、、硝酸纤维素膜(NC膜)以及吸水垫等部件组分。。。。
前端的样品垫与金标垫相连,,,,NC膜一端连着金标垫,,,另一端连着吸水纸。。。。四部分之间有部分重叠,,依次粘贴在聚氯乙烯(PVC)底板上,,确保液体样品可以沿着预定路径流动,,,,从而形成完整的试纸条体系。。这种贴板方式就是咱们常见的试纸条组分(样品垫+金标垫+NC膜+吸水垫)。。。。
为了满足某些项目不同样品类型的特殊要求,,试纸条结构会进行一些微调,,,,以下举例免疫层析试纸条中建议组件的组装顺序和位置调整及原因,,,,基于不同样品特性和检测需求优化:
小分子竞争法检测
上样端组装顺序:样品垫置于最前端,,,紧接金标垫,,,后连缓冲垫,,,各组分部分重叠;
操作原因:
待测样本流经金标垫上与标记抗体反应结合,,,使待测小分子先占据结合位点,,并拉长了复合物到达NC膜的时间,,,提高了低浓度样品的灵敏度;
粪便样品检测
上样端组装顺序:滤血膜置于上样最前端,,,紧接部分重叠样品垫(加厚玻璃纤维素膜)和金标垫;
操作原因:
1.前端滤血膜拦截粪便中的纤维残渣,,,以降低NC膜堵膜风险;
2.加厚的玻璃纤维素膜作为样品垫起到二次过滤和吸附脂溶性干扰物(如胆色素),,,,提升带条的显色程度;
全血样品检测
上样端组装顺序:样品垫置于最前端,,紧接滤血膜(可预处理RBC抗体),,,,后连金标垫,,,,各组分部分重叠;
操作原因:
玻璃纤维素膜和滤血膜均起到过滤作用,,去除部分干扰物,,,全血样品流经滤血膜时有效拦截样品中红细胞,,,,提升显色条带与试纸背景的对比度;
痰液样品检测
优化方向:样品垫预先处理时在缓冲液中适量添加Triton X-100或CHAPS,,破解黏液结构并降低粘度,,,,加速层析;
高脂血症样品检测:
优化方向:样品垫预先处理时在缓冲液中适量添加螯合剂EDTA或枸橼酸盐,,可阻止脂蛋白胶束形成,,,,减少非特异性吸附;
以上内容均为大家提供参考,,,,详细用法用量需要实验验证。。。。
感谢观看本期推文,,本期主要介绍了常规试纸条的贴板方式和根据不同样品特性和检测需求,,,,建议组件的组装顺序和位置调整及原因,,希望可以帮助到大家。。。下期将为大家分享到对于胶体金的理解,,,胶体金怎么标记抗体??标记时又有哪些影响因素???请持续关注我们,,,为大家继续分享。。